2008年CRTER杂志论著类稿件体例(中文英文4.0-6.0版／篇)_专业资料。维普资讯 … 薄 占 东 等神 经 营 养 素 ３ 基 因转 染 神 经 于 细 匏 瑟 其 表 达 神 经 营养 素 ３基 因转 染 神 经
维普资讯 … 薄 占 东 等神 经 营 养 素 ３ 基 因转 染 神 经 于 细 匏 瑟 其 表 达 神 经 营养 素 ３基 因转 染 神 经 干 细 胞 及 其 表 达 ☆ 薄 占东， 赵 劲 民， 杨 志， 苏 伟， 洪 光 祥 ： ，雷 正 旺 广西医科 大学 第一 附属 医院 创伤 骨科手 外科 ，广西壮族 自治区 南宁市 ５ ０ ２ ； 华 中科技 大学 同济医学院 附属协和 医院 ３０ １ 手 外科 ，湖北 省武汉 市 ４０ ２ ３０ ２ 薄 占东☆ ，男，１ ７ 年生 ，河 南省扶 沟县人 ，汉 族 ，２ ０ 年 华 中科技 大学 同济医学院毕 业，博士 ，副教授 ，主要从事 创伤 ９１ ０４ 骨 科 和 周 围 神 经 损 伤 的 研 究 摘 要 背景 ：应用 包括神经营养 素 ３的神 经营养 因子促进周 围神经 再生是 当今 周围神经再 生研究 的热点之一， 但是临床 应用上缺 乏安全 、有效 的给 药 途 径 。基因转 染技 术为 神经营 养 因子 的临床 应用提 供 了新的 思路和 途径 。 目的：用神 经营养 素 ３基因修 饰神 经干 细胞 ，并观 察在转 染后 的神经 干 细胞 内的表 达情 况 。 设 计 ：完全 随机试 验 。 单位 ：广西 医科 大学第 一 附属 医 院创伤 骨科 手外 科和华 中科 技大 学同济 医学 院附属 协和 医 院手外科 。 材 料：实验选 用健康 Ｓ Ｄ大 鼠 ３ ，鼠龄 ４个月 ，雌雄 不拘 ，由华中科技大 学 同济医 学院动物房提 供 。用 于转染神经 干细胞 的重组腺病 毒表 只 达载 体 由华 中科技 大学 同济 医学 院协和 医 院骨 科 实验 室构建 ， 浓度 为 Ｏ１／ ．５ｇＬ。 方法 ：实验 于 ２ ０ ．２ ０ ４０ 在华中科技 大学同济 医学院协和 医院骨科 实验 室和 同济医 院中心 实验室完 成 。采用 阳离子脂质 体介入法 ，将 ０ ２ １／ ０ — ２ ３ 含绿色荧 光蛋 白（ Ｆ ） 因的重组质粒 ｐ ｄ神经 营养素 ３ Ｇ Ｐ基 Ａ ． 转染原代 培养的神经 干细胞 ， 转染 ７ 后采用 荧光倒置显 微镜观 察绿 色荧光 蛋白在 ２ｈ 神经干 细胞上 的表 达 ，测 定转染率 。采用免疫 细胞化学染 色法和 反转 录． 聚合酶链 反应检测转 染 ７ ， ｌ 周后 神经营养 素 ３ 因在神经干 ２ ｈ ，５ 基 细 胞 中 的表 达 和 转 录 情 况 。 主 要观 察指标 ；神经 营养 素 ３基 因在 转染 后的神 经干 细胞 内的表 达情 况 。 结 果：① 重组质粒 ｐ ｄ神 经营养素 ３转染神经干 细胞 ：转染 ７ ｈ Ａ． ２ 绿色荧光 蛋白在部 分神经干 细胞上有表达 ， 染率为 ４ ％。５ 后仍可见绿 转 ０ 周 色 荧光蛋 白的表 达 。②神经 营养素 ３ 基因在神经 干细胞 中的转录 与表 达 ：转 染 ７ ，ｌ 周后神 经干细胞 中均有神经 营养素 ３ｍ Ｎ ２ｈ ，５ Ｒ Ａ的转 录 ，转 染 ５周 后仍有 神经 营养 素 ３ｍＲＮＡ 的表达 。 结 论 ：神 经营 养素 ３基 因以 阳离子脂 质体 为载 体，通 过腺 病毒 的介 导，可 有效 的转染 培养 的神经 干 细胞 并长期表 达 。 关 键词 ：神经 营养 素 ３ ；神经干 细胞 ； 阳离子脂 质体
